一、液相色谱仪流动相的标准配制方法
严格按照规范流程配制流动相，是保证分析结果重复性和仪器稳定运行的基础，每一步操作都不能随意简化。
1、试剂纯度与称量规范
配制流动相使用的有机溶剂必须是色谱纯级别，绝对不能用分析纯试剂代替，分析纯试剂中的杂质含量很高，会导致基线噪音极大，还会污染色谱柱，大幅缩短色谱柱寿命。水相必须使用超纯水，电阻率达到18.2MΩ·cm，不能直接用自来水、普通蒸馏水配制，避免水中的杂质、微生物污染系统。所有试剂的移取都使用精准的移液管、容量瓶定容，不要用烧杯粗略估算体积，保证流动相配比的精准度，才能保证不同批次分析的保留时间高度一致，结果重复性好。
2、pH值精准调节
涉及缓冲盐的流动相，必须精准调节pH值，使用精度0.01的精密pH计进行校准，不要用广泛pH试纸粗略判断，pH值偏差超过0.2就会导致目标物的保留时间发生明显偏移，分析结果完全不可靠。调节pH时要使用对应的酸和碱缓慢滴加，边滴加边搅拌，避免局部pH值过高或过低，损坏色谱柱的填料。
3、有机相和水相混合规范
有机相和水相混合时，要将密度大的溶剂缓慢倒入密度小的溶剂中，边倒边搅拌，避免混合过程中产生大量微小气泡，后续脱气的工作量大幅增加。不要剧烈摇晃混合流动相，否则会溶解大量空气，后续很难完全脱除干净，进样后系统很容易出现气泡，导致基线波动、压力不稳。
二、流动相过滤脱气的核心注意事项
过滤和脱气是流动相使用前必不可少的步骤，操作不到位会直接引发仪器故障，必须严格执行规范。
1、过滤操作要点
所有流动相使用前必须经过0.45μm的微孔滤膜过滤，有机相使用有机系尼龙滤膜，水相使用水系水相滤膜，有机相和水相混合后的流动相使用兼容有机和水的混合系滤膜，绝对不能混用滤膜，否则有机相会溶解水系滤膜，大量杂质进入系统，直接堵塞色谱柱。过滤时要缓慢抽滤，不要抽滤速度太快，避免流动相在低压下快速析出大量气泡，增加后续脱气的难度。过滤完成后的流动相要储存在带盖的储液瓶中，避免长时间敞口放置，落入灰尘杂质。
2、脱气操作要点
过滤后的流动相必须进行脱气处理，最常用的是超声脱气法，将流动相放在超声清洗器中，超声15-20分钟，同时通入少量氦气辅助脱气，能完全溶解在流动相中的微小气泡。绝对不能省略脱气步骤，流动相中溶解的大量空气，进入高压系统后会在低压的检测器流通池中析出气泡，导致基线出现大量尖锐的鬼峰，基线完全无法平稳，分析结果完全不可用。
3、特殊流动相的脱气注意事项
含有高比例有机相的流动相，超声脱气的时间不要超过30分钟，长时间超声会导致有机溶剂挥发，流动相的配比发生明显变化，直接影响分析结果的重复性。含有缓冲盐的流动相，超声脱气时温度不要超过30℃，避免温度升高导致缓冲盐析出结晶，后续进入系统堵塞管路和色谱柱，引发严重的压力故障。
三、流动相使用的配套维护要点
含有缓冲盐的水相流动相，建议现用现配，常温下存放不要超过24小时，避免水中滋生大量微生物，长菌后的流动相不仅会污染系统，还会产生大量鬼峰，干扰分析结果。每次分析结束后，不要让高比例缓冲盐的流动相长时间留在系统中，及时用高比例水相冲洗系统，把管路中的缓冲盐完全置换干净，避免盐析出结晶堵塞系统，保护仪器流路和色谱柱的安全。
